副猪嗜血杆菌病原学研究进展

更新时间：2024-11-24 17:08:22

　　副猪嗜血杆菌是副猪嗜血杆菌病的病原菌．属于巴斯德菌科嗜血杆菌属，无芽孢，不运动，兼性厌氧。早在1910年，德国学者Glasser就发现一种革兰氏阴性短小杆菌与猪的纤维素性浆膜炎和多发性关节炎之间有联系。并由Scher

　　副猪嗜血杆菌是副猪嗜血杆菌病的病原菌．属于巴斯德菌科嗜血杆菌属，无芽孢，不运动，兼性厌氧。早在1910年，德国学者Glasser就发现一种革兰氏阴性短小杆菌与猪的纤维素性浆膜炎和多发性关节炎之间有联系。并由Schermer和Ehrlich在1922年首次分离到。起初Hjarre和Wramby（1943）将病原体称为猪嗜血杆菌（Haemophilussuis），而Leece（1960）将病原体称为猪流感嗜血杆菌（Haemophilusinfluenzaswine）。在证明了该菌生长时不需要x因子（血红素和其他卟啉类物质）的基础上该菌更名为副猪嗜血杆菌。

　　1生化特性

　　副猪嗜血杆菌在显微镜下可观察到多种不同的形态，从单个的球杆菌到细长的甚至丝状的菌体，大小不等，约0．5μm×l．5～2．0μm。革兰氏染色呈阴性，有荚膜（多次体外培养或长时间培养荚膜易丢失），其生长依赖烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD或V因子），该菌在添加有NAD的5％马血琼脂平板上，37℃培养24—48h生长成边缘整齐、小而透明的不溶血菌落；在金黄色葡萄球菌的培养物周围形成典型的“卫星菌落”；对环境抵抗能力弱，60℃短时间即可死亡，通常不易保存。一20℃仅能保存14～17d。一70℃可保存较长时间。

　　2分型方法

　　2．1血清学分型

　　按Kieletein—Rapp-Gabriedson（KRG）血清分型方法，至少可将副猪嗜血杆菌分为15个血清型．另有20％左右的分离株不能分型。并且血清型之间存在大范围的交叉反应，很难找到一个特异性的血清型反应。间接血凝试验（indirectthemagglutinationassay，IHA）的特异性较高，能对90％的副猪嗜血杆菌进行分型，包括那些在免疫扩散试验（immunodiffusiontest）中起交叉反应的菌株。

　　2．2蛋白多态性图谱分型法

　　2．2．1外膜蛋白指纹图谱分型法。近年来的研究表明，副猪嗜血杆菌的毒力因子与外膜蛋白（outermembraneproteins，OMPs）相关。AlvaroRuiz等研究了副猪嗜血杆菌0MPs的基因型、表型与菌株分离部位之间的关系。结果显示来自机体全身各部位（systemicsite）的副猪嗜血杆菌的0MPs和DNA指纹比来自呼吸道的菌株有更高的同源性。

　　2．2．2多位点酶电泳图谱分型法。Blackall等用多位点酶电泳（muhilocusenzymeelectrophoresis，MEE）研究了40株澳大利亚副猪嗜血杆菌分离株及8株标准株的多位点酶电泳图谱。

　　2．3限制性核酸内切酶指纹图谱分型法

　　Smart等阎运用限制性核酸内切酶指纹（restrictionendonucleasefingerprimin9，REF）技术研究副猪嗜血杆菌在SPF猪和饲养猪的定居和分布。在69株分离菌株中，24株有特异的REF图谱，其余45株分离株形成13个有交叉的REF图谱。这项研究显示大多数SPF猪带有相同的副猪嗜血杆菌，而饲养猪带菌范围很广。仅仅一个菌株是所有试验猪共有的。来源于地方性传染病猪各器官中的分离菌株的REF图谱很相似，并且不同于同一地区健康猪鼻腔中分离菌株的REF图谱。

　　2．4PCR技术分型法

　　2．4．1重复序列PCR技术分型法。重复序列PCR（repetitiveelementbased—PCR，Rep—PCR）技术是以与基因组重复序列互补的寡聚核苷酸为引物，扩增出重复序列之间的长度不等的DNA片段，电泳分离扩增产物，建立特定细菌的特异DNA指纹图谱。

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